circCLK3通过靶向miR-654-5p促进结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究

文章亮点

实验背景

先前的研究证实了环状RNA在包括结直肠癌在内的多种恶性肿瘤进展中发挥了重要调节因子作用. 然而, circCLK3的功能和潜在的调控机制在结直肠癌进展尚不清楚.

实验动机

探索circCLK3是否可以调控结直肠癌的进展, 为临床治疗结直肠癌提供有效靶点.

实验目标

以miR-654-5p为切入点探索circCLK3在结直肠癌中的作用和机制, 这可能是CRC的治疗靶点.

实验方法

qRT-PCR法检测circCLK3、miR-654-5p在结直肠癌组织及癌旁组织的表达; 采用CCK8、克隆形成实验、划痕实验与Transwell实验分析细胞增殖、迁移及侵袭; 采用双荧光素酶报告分析circCLK3与miR-654-5p的靶向关系; 采用Western blot检测基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)-2、MMP-9蛋白表达.

实验结果

我们实验结果证实了circCLK3在结直肠癌中的作用和潜在的机制. 数据展示了circCLK3在结直肠癌组织中高表达, 而miR-654-5p低表达;功能实验验证 si-circCLK3可以降低细胞活力、划痕愈合率、MMP-2和MMP-9蛋白表达、克隆形成数和侵袭细胞数; circCLK3可负向调控miR-654-5p的表达; miR-654-5p抑制细胞活力、划痕愈合率、MMP-2和MMP-9蛋白表达、克隆形成数和侵袭细胞数; 另外, si-circCLK3+anti-miR-654-5p可以促进细胞活力、划痕愈合率、MMP-2和MMP-9蛋白表达、克隆形成数和侵袭细胞数.

实验结论

这次研究揭示了circCLK3在结直肠癌组织和细胞中上调, 干扰circCLK3通过促进miR-654-5p表达来抑制结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭. 因此, 我们认为circCLK3/miR-654-5p轴可能对调节结直肠癌进展至关重要, 并且可能是结直肠癌的治疗靶点.

展望前景

本研究了circCLK3/miR-654-5p轴可以调控结直肠癌生物恶性行为, 为临床治疗CRC提供有效靶点.