基础研究
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世界华人消化杂志. 2021-01-08; 29(1): 7-14
Published online 2021-01-08. doi: 10.11569/wcjd.v29.i1.7
LncRNA LINC01224/miR-513b-5p对结肠癌细胞SW1116增殖、迁移及侵袭的影响
张兆辉, 王利民
张兆辉, 王利民, 金华市中心医院肝胆胰外科 浙江省金华市 321000
张兆辉, 主治医师, 研究方向为肝胆胰和消化.
作者贡献分布: 此课题由张兆辉与王利民设计; 研究过程由张兆辉与王利民操作完成; 研究所用试剂由张兆辉提供; 数据分析由王利民完成; 本论文写作由张兆辉完成.
通讯作者: 张兆辉, 主治医师, 321000, 浙江省金华市婺城区明月街351号, 金华市中心医院肝胆胰外科. congzhuo19960515@163.com
收稿日期: 2020-10-29
修回日期: 2020-11-16
接受日期: 2020-11-26
在线出版日期: 2021-01-08
文章亮点
实验背景

早期结肠癌患者临床症状不明显导致患者确诊时已失去最佳治疗时机, 目前尚缺乏结肠癌早期诊断的有效标志物, 手术、化疗等是临床治疗结肠癌的常用手段, 但患者预后很差, 随着医疗技术的进步, 分子靶向治疗成为研究重点, 但目前尚缺乏结肠癌发展相关的基因作为治疗靶点, LncRNA作为非编码RNA, 其基因序列可吸附多个miRNA而发挥癌基因或抑癌基因作用, 因而急需探寻新型LncRNA作为结肠癌治疗靶点.

实验动机

LINC01224在肝癌等肿瘤中表达水平升高, 并可能作为癌基因而参与多种肿瘤发生及发展过程, 但LINC01224在结肠癌中的表达及其可能作用机制尚未阐明. 同时通过靶基因预测显示miR-513b-5p与LINC01224存在结合位点, miR-513b-5p在结肠癌中表达水平降低, 因而本研究主要探究LINC01224/miR-513b-5p分子轴在结肠癌发生及发展过程中的作用机制.

实验目标

验证LINC01224在结肠癌发生及发展过程中发挥癌基因作用, LINC01224可靶向调控miR-513b-5p从而参与结肠癌发生及发展过程.

实验方法

采用qRT-PCR法检测结肠癌组织中LINC01224与miR-513b-5p的表达水平; 采用MTT法检测细胞增殖; 应用流式细胞仪检测细胞周期; 采用Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭; 双荧光素酶报告基因实验验证LINC01224与miR-513b-5p的靶向关系.

实验结果

结肠癌组织中LINC01224的表达水平升高, 而miR-513b-5p的表达水平降低, 干扰LINC01224表达可抑制结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭及诱导细胞周期阻滞于G0-G1期; LINC01224可吸附miR-513b-5p而负向调控其表达及活性; 抑制miR-513b-5p表达可拮抗干扰LINC01224表达对结肠癌细胞周期、增殖、迁移及侵袭的作用.

实验结论

LINC01224可通过靶向抑制miR-513b-5p的表达而促进结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭.

展望前景

LINC01224可能作为结肠癌靶向治疗的潜在靶点, 还可能作为临床早期诊断结肠癌的潜在生物标记物.