基础研究
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世界华人消化杂志. 2022-07-08; 30(13): 571-578
Published online 2022-07-08. doi: 10.11569/wcjd.v30.i13.571
lncRNA NNT-AS1调控miR-518a-3p抑制IL-17诱导胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制
张晶, 王博, 王红霞, 孔凡铭, 李小江, 贾英杰
张晶, 孔凡铭, 李小江, 贾英杰, 天津中医药大学第一附属医院肿瘤科 天津市 300380
张晶, 主治医师, 研究方向为中西医结合肿瘤、肿瘤免疫.
王博, 天津市第三中心医院急诊科 天津市 300380
王红霞, 天津中医药大学第一附属医院消化科 天津市 300380
基金项目: 国家自然科学基金, No. 81503392.
作者贡献分布: 此课题由张晶、王博、王红霞、孔凡铭、李小江、贾英杰设计; 研究过程张晶、王博、王红霞、孔凡铭、李小江、贾英杰共同操作完成; 研究所用新试剂及分析工具由张晶、王博、王红霞提供; 数据分析由孔凡铭、李小江、贾英杰完成; 本论文写作由张晶完成.
通讯作者: 张晶, 主治医师, 300380, 天津市西青区昌凌路88号, 天津中医药大学第一附属医院肿瘤科. zhang.jing.1216@163.com
收稿日期: 2022-04-08
修回日期: 2022-04-29
接受日期: 2022-06-21
在线出版日期: 2022-07-08
Abstract
背景

白细胞介素17(interleukin 17, IL-17)是多细胞分泌因子, 与肿瘤细胞发展有关, lncRNA NNT-AS1胃癌组织中lncRNA NNT-AS1表达上调, lncRNA NNT-AS1可能通过降低miR-363的表达抑制胃癌细胞增殖和侵袭, 并阻滞细胞周期的发展.关于lncRNA NNT-AS1与IL-17调控作用对胃癌细胞研究尚不明确.

目的

探究长链非编码RNA烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1(lncRNA NNT-AS1)调控miR-518a-3p抑制IL-17诱导胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的分子机制.

方法

使用IL-17处理胃癌细胞AGS, 将细胞分为对照(Con)组、IL-17组、IL-17+si-NC组、IL-17+si-lncRNA NNT-AS1组、IL-17+si-lncRNA NNT-AS1+anti-miR-NC组、IL-17+si-lncRNA NNT-AS1+anti-miR-518a-3p组. 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-518a-3p和lncRNA NNT-AS1表达水平; 克隆实验、Transwell检测AGS细胞增殖、迁移、侵袭; 蛋白印迹法(Western blot)检测增殖、转移蛋白表达; 双荧光素酶实验检测miR-518a-3p和lncRNA NNT-AS1关系.

结果

与Con组相比, IL-17组克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数增多, lncRNA NNT-AS1表达水平、细胞核增殖抗原标记物(Ki-67)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2, MMP2)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达升高, miR-518a-3p表达水平、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达降低. 下调lncRNA NNT-AS1降低IL-17处理胃癌细胞克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数, 下调Ki-67、N-cadherin、MMP2蛋白表达, 上调E-cadherin蛋白表达增加. lncRNA NNT-AS1靶向调控miR-518a-3p的表达, 抑制miR-518a-3p可以逆转下调NNT-AS1对IL-17诱导胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响.

结论

lncRNA NNT-AS1靶向调控miR-518a-3p抑制IL-17诱导胃癌细胞增殖、迁移和侵袭.

Keywords: 胃癌; 增殖; 迁移; 侵袭

核心提要: lncRNA NNT-AS1通过调控miR-363抑制胃癌细胞增殖和侵袭, 并阻滞细胞周期. 关于lncRNA NNT-AS1与白细胞介素17(interleukin 17, IL-17)调控作用对胃癌细胞研究尚不明确. 在线生物信息学软件预测miR-518a-3p是NNT-AS1靶基因, 在三阴性乳腺癌、结直肠癌中miR-518a-3p表达下调, 但是在胃癌中未知.