基础研究
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世界华人消化杂志. 2021-04-28; 29(8): 398-406
Published online 2021-04-28. doi: 10.11569/wcjd.v29.i8.398
藤梨根提取物通过调控miR-192-5p/ARPP19轴影响结直肠癌细胞的增殖和凋亡
徐万苏, 柯飞, 许怡, 郑艺
徐万苏, 衢州市人民医院肿瘤放疗科 浙江省衢州市 324000
徐万苏, 主治医师, 研究方向为肿瘤学.
柯飞, 衢州市人民医院病理科 浙江省衢州市 324000
许怡, 郑艺, 衢州市人民医院消毒供应中心 浙江省衢州市 324000
作者贡献分布: 本文由徐万苏、柯飞、许怡、郑艺统计并撰写; 徐万苏审阅.
通讯作者: 徐万苏, 本科,主治医师, 324000, 浙江省衢州市柯城区钟楼底2号衢州市人民医院肿瘤放疗科. xws121987@163.com
收稿日期: 2021-01-23
修回日期: 2021-03-01
接受日期: 2021-03-27
在线出版日期: 2021-04-28
Abstract
背景

藤梨根提取物(rattan root extract, RRE)可抑制胃癌、肺癌等肿瘤细胞增殖, 具有一定抗肿瘤作用, 但其是否影响结直肠癌细胞的恶性表型还未知. miR-192-5p在结直肠癌组织中表达降低, 且其低表达与肿瘤大小等临床病理特征相关, 可作为结直肠癌诊治的潜在生物学标志物. StarBase生物信息学软件预测显示, 环腺苷酸调节的磷酸化蛋白19(cAMP-regulated phosphoprotein 19, ARPP19)可能是miR-192-5p的靶基因. 本研究假设RRE可通过调控miR-192-5p/ARPP19轴影响结直肠癌细胞增殖和凋亡.

目的

探讨RRE对结直肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响及作用机制.

方法

RRE干预SW480细胞后, MTT检测细胞增殖, 流式细胞术检测细胞凋亡, 蛋白质印迹法检测细胞中CyclinD1、C-caspase-3和ARPP19蛋白水平, RT-qPCR检测细胞中miR-192-5p和ARPP19 mRNA水平. 转染miR-192-5p模拟物或ARPP19小干扰RNA至SW480细胞, 上述相同方法观察过表达miR-192-5p或抑制ARPP19表达对SW480细胞增殖、凋亡及CyclinD1和C-caspase-3蛋白表达的影响. 双荧光素酶报告基因实验验证miR-192-5p和ARPP19调控关系.

结果

RRE可降低SW480细胞存活率及ARPP19 mRNA和蛋白的表达(P<0.05), 增加SW480细胞凋亡率及C-caspase-3蛋白和miR-192-5p的表达(P<0.05). 过表达miR-192-5p或抑制ARPP19表达均可降低SW480细胞存活率及CyclinD1蛋白表达(P<0.05), 而提高SW480细胞凋亡率及C-caspase-3蛋白表达(P<0.05). miR-192-5p在SW480细胞中靶向负调控ARPP19表达. 抑制miR-192-5p表达可逆转RRE对SW480细胞增殖、凋亡及CyclinD1和C-caspase-3蛋白表达的影响. 抑制ARPP19表达可逆转抑制miR-192-5p表达对RRE处理的SW480细胞增殖、凋亡及CyclinD1和C-caspase-3蛋白表达的影响.

结论

RRE可有效抑制结直肠癌SW480细胞增殖, 促进细胞凋亡, 其作用机制与调miR-192-5p/ARPP19轴有关.

Keywords: 结直肠癌; 藤梨根提取物; miR-192-5p; 环腺苷酸调节的磷酸化蛋白19; 细胞增殖; 凋亡

核心提要: 藤梨根提取物可降低结直肠癌SW480细胞的增殖能力, 并诱导细胞凋亡, 其可能通过上调miR-192-5p进而抑制ARPP19的表达发挥作用.