Published online 2006-05-08. doi: 10.11569/wcjd.v14.i13.1272
修回日期: 2006-03-05
接受日期: 2006-03-20
在线出版日期: 2006-05-08
目的: 探讨活血化瘀复方中药益肝康抑制大鼠肝星状细胞(HSC)增殖的作用机制.
方法: 采用IL-1β激活HSC, 应用Western blot检测JNK的活化程度; 应用活细胞计数试剂盒-CCK-8检测HSC增殖并观察JNK特异性阻断剂SP600125对IL-1β促HSC增殖的影响. 应用凝胶电泳移动抑制法测定AP-1的活性.
结果: IL-1β有明显促大鼠HSC增殖作用, IL-1β作用培养的HSC 24 h后, 吸光值明显高于对照组(1.573±0.026 vs 1.339±0.073, P = 0.000); 经JNK特异性阻滞剂SP600125预处理后, IL-1β促HSC增殖作用受到抑制, SP600125浓度为10, 20及40 mmol/L时, 吸光值分别为1.427±0.113, 0.772±0.093, 0.675±0.074, 与对照组(1.560±0.110)相比其增殖反应均明显降低(P = 0.03; P = 0.000; P = 0.000); IL-1β可激活大鼠HSCs JNK信号蛋白, 并呈现出一定的时相变化. IL-1β作用HSCs后0, 5, 15, 30, 60及120 min, JNK活性分别为0.982±0.299, 1.501±0.720, 2.133±0.882, 3.360±0.452, 2.181±0.789, 1.385±0.368. 与0(未加IL-1β)相比, 15 min, 30 min及60 min均有显著差异(P = 0.002, P = 0.000, P = 0.001). 益肝康可抑制IL-1β诱导的HSCs JNK活性(1.610±0.242 vs 3.360±0.452, P = 0.000); 益肝康可抑制IL-1β诱导的HSCs AP-1活性, 经益肝康预处理HSCs 1 h后, AP-1活性明显受到抑制(342.43±85.77 vs 597.70±83.96, P = 0.005).
结论: IL-1β可刺激HSC增殖, 细胞内JNK信号转导通路参与了IL-1β促HSC增殖作用; 益肝康可通过阻滞JNK/AP-1通路, 抑制HSC增殖.