瑞芬太尼通过miR-206/GOLPH3调控胃癌细胞增殖和凋亡的实验研究

摘要

背景

瑞芬太尼为临床上常用的麻醉药, 近几年其新功效不断被发现, 尤其是抗癌功能. 但瑞芬太尼在胃癌(gastric cancer, GC)中的作用及机制尚未清楚.

目的

探讨瑞芬太尼对AGS、MKN-45人GC细胞中miR-206、GOLPH3表达及细胞增殖、凋亡的影响.

方法

以40 nmol/L瑞芬太尼干预AGS、MKN-45细胞, qRT-PCR、Western blot、MTT和流式细胞仪分别检测细胞中miR-206和GOLPH3表达及细胞活力、凋亡. 在AGS、MKN-45细胞中过表达miR-206或敲减GOLPH3, MTT和流式细胞仪检测细胞活力和凋亡. Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因实验和Western blot实验验证miR-206和GOLPH3的靶向关系. 将miR-206 inhibitors或pcDNA-GOLPH3转染至AGS、MKN-45细胞并以40 nmol/L瑞芬太尼进行处理, 检测细胞活力和凋亡.

结果

瑞芬太尼干预的AGS、MKN-45细胞中miR-206高表达而GOLPH3低表达, 细胞活力降低而凋亡率升高. 过表达miR-206或敲减GOLPH3, 细胞活力下降、凋亡率升高. Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因实验和Western blot实验结果表明, miR-206可靶向调控GOLPH3蛋白表达. 下调miR-206或过表达GOLPH3能够逆转瑞芬太尼对AGS、MKN-45细胞增殖的抑制和凋亡的促进作用.

结论

瑞芬太尼能够通过调节miR-206和GOLPH3表达抑制AGS、MKN-45细胞增殖并诱导凋亡.

关键词: 瑞芬太尼; 胃癌; miR-206; GOLPH3

核心提要: 瑞芬太尼能够通过调节miR-206和GOLPH3表达抑制AGS细胞增殖并诱导凋亡.

Remifentanil regulates proliferation and apoptosis of gastric cancer cells by regulating miR-206/GOLPH3

Xiao-Jun Chen, Xin-Ning Shen, Liang Chen

Xiao-Jun Chen, Xin-Ning Shen, Department of Anesthesiology, Yiwu Central Hospital, Yiwu 322000, Zhejiang Province, China

Liang Chen, Department of Oncology, Yiwu Central Hospital, Yiwu 322000, Zhejiang Province, China

Corresponding author: Xiao-Jun Chen, Resident Physician, Department of Anesthesiology, Yiwu Central Hospital, 699 Jiangdong Road, Yiwu 322000, Zhejiang Province, China. 916555076@qq.com

Received: December 7, 2018
Revised: January 8, 2019
Accepted: January 29, 2019
Published online: February 28, 2019

Abstract

BACKGROUND

Remifentanil is a commonly used anesthetic in clinical practice. In recent years, its new efficacy has been continuously discovered, especially its anti-cancer function. However, the role and mechanism of remifentanil in gastric cancer (GC) are still not clear.

AIM

To investigate the effect of remifentanil on the expression of miR-206, GOLPH3, cell proliferation, and apoptosis in human GC cell lines AGS and MKN-45.

METHODS

The expression of miR-206 and GOLPH3 and the viability and apoptosis of AGS and MKN-45 cells after treatment with 40 nmol/L remifentanil were detected by qRT-PCR, Western blot, MTT assay, and flow cytometry, respectively. Cell viability and apoptosis of AGS and MKN-45 cells with overexpression of miR-206 or knockdown of GOLPH3 were detected by MTT assay and flow cytometry, respectively. The targeting relationship between miR-206 and GOLPH3 was verified by Targetscan online prediction, dual-luciferase assay, and Western blot. After transfection with miR-206 inhibitor or pcDNA-GOLPH3, AGS and MKN-45 cells were treated with 40 nmol/L remifentanil and then detected for cell viability and apoptosis.

RESULTS

After treatment with remifentanil, the expression of miR-206 and apoptosis rate were increased while the expression of GOLPH3 and cell viability were decreased in AGS and MKN-45 cells. Cell viability was decreased and apoptotic rate was increased in AGS and MKN-45 cells after overexpression of miR-206 or knockdown of GOLPH3. The results of Targetscan online prediction, dual-luciferase assay, and Western blot indicted that miR-206 could regulate the expression of GOLPH3 protein. Down-regulation of miR-206 or overexpression of GOLPH3 could reverse the inhibition of proliferation and apoptosis of AGS and MKN-45 cells by remifentanil.

CONCLUSION

Remifentanil could inhibit the proliferation and induce apoptosis of AGS and MKN-45 cells by regulating the expression of miR-206 and GOLPH3.

Key Words: Remifentanil; Gastric cancer; miR-206; GOLPH3

0 引言

胃癌(gastric cancer, GC)是世界常见的消化道恶性肿瘤, 据统计[1], 2015年全球GC新发病例约130万, 死亡82万例; 其中, 仅我国GC新发病例就高达67万, 死亡50万例, 已成为继肺癌之后的第二大常见恶性肿瘤[2]. 采用手术除术、放化疗等综合治疗方式治疗早期GC患者效果显著, 5年生存率达90%[3-5]; 但因GC早期缺乏明显症状, 多数患者就诊时已处于进展期, 大大增加了治疗难度, 导致患者预后较差, 仅有10-12 mo的中位生存期, 总体5年生存率约10%[6]. 针对晚期GC治疗的瓶颈是易产生耐药性. 因此, 新药的研发对晚期GC治疗具有重要意义. 瑞芬太尼(Remifentanil)是一种μ型受体激动剂, 具镇痛作用, 能够通过组织和血液中的非特异性酯酶进行代谢, 为临床上常用的麻醉剂[7]. 多项研究[8,9]表明, 瑞芬太尼能够有效体外抑制结肠癌、乳腺癌等肿瘤细胞增殖, 同时促进细胞凋亡. 本研究通过使用40 nmol/L瑞芬太尼处理AGS、MKN-45人GC细胞检测细胞活力和凋亡, 以探讨瑞芬太尼对AGS、MKN-45细胞增殖、凋亡的影响及其作用靶点.

1 材料和方法

1.1 材料

AGS、MKN-45人GC细胞购自ATCC; 胎牛血清、RPMI1640培养液、胰蛋白酶购自美国Gibco-BRL公司; MTT购自美国Sigma公司; 二甲基亚砜(DMSO)、ECL发光液、RIPA裂解液、PVDF膜购自北京Solarbio公司; Lipofectamine TM 2000转染试剂购自美国Invitrogen公司; GOLPH3 siRNA、control siRNA由山东维真生物科技有限公司公司设计合成; pcDNA-GOLPH3过表达载体由金瑞斯生物科技公司构建; miR-206 mimics、control mimics、miR-206 inhibitors、control inhibitors由上海吉玛基因公司设计合成; 兔抗GOLPH3、GAPDH多克隆抗体、辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔IgG购自美国Abcam公司; Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒购自上海前尘生物科技有限公司; 双荧光素酶报告基因检测系统购自美国Promega公司; Trizol试剂购自北京天根生化科技有限公司; TaKaRa反转录试剂盒、TaKaRa实时荧光定量试剂盒购自宝生物工程(大连)有限公司; NanoDrop微量核酸测定仪购自美国赛默飞世尔科技公司; ELx808吸收光酶标仪购自赛默飞世尔科技有限公司; Forma TM Steri-cycle TM i160 CO2细胞培养箱购自美国Thermo公司; CFX96 Touch TM荧光定量PCR检测系统、ChemiDoc TM MP凝胶成像系统购自美国Bio-Rad公司.

1.2 方法

1.2.1 细胞培养与分组: 将AGS、MKN-45细胞放入37 ℃ 恒温水浴锅中以融化细胞, 800 g离心收集. 使用含10% 胎牛血清的RPMI 1640培养液于37 ℃、5% CO₂饱和湿度条件下培养, 取对数生长期的细胞, 胰酶消化后重悬, 调整细胞悬液浓度为1×10⁵个/mL并接种于24孔板. 待细胞生长至汇合度约45%, 按照Lipofectamine 2000转染试剂说明书分别将miR-206 mimics、control mimics、miR-206 inhibitors、control inhibitors、GOLPH3 siRNA、control siRNA、pcDNA、pcDNA-GOLPH3转染至AGS、MKN-45细胞, 并依次标记为miR-206组、miR-NC组、anti-miR-206组、anti-miR-NC组、si-GOLPH3组、si-NC组.

将AGS、MKN-45细胞分为Re组、Con组、Re+anti-miR-206组、Re+anti-miR-NC组、Re+pcDNA-GOLPH3组、Re+pcDNA组. 处理方法: 使用0.9%氯化钠完全溶解瑞芬太尼并使用无菌过滤器过滤. Re组: 细胞培养液中加入瑞芬太尼溶液并调整终浓度为40 nmol/L[9]; Con组: 细胞培养液中加入等量0.9%氯化钠; Re+anti-miR-206组: 转染miR-206 inhibitors的细胞使用含终浓度为40 nmol/L瑞芬太尼的培养液培养; Re+anti-miR-NC组: 转染control inhibitors的细胞使用含终浓度为40 nmol/L瑞芬太尼的培养液培养; Re+pcDNA-GOLPH3组: 转染pcDNA-GOLPH3的细胞使用含终浓度为40 nmol/L瑞芬太尼的培养液培养; Re+pcDNA组: 转染pcDNA的细胞使用含终浓度为40 nmol/L瑞芬太尼的培养液培养. 每组6个复孔, 实验重复3次.

1.2.2 qRT-PCR: 收集各组对数生长期的细胞, 充分研磨后加入Trizol试剂提取总RNA, 微量核酸测定仪检测其纯度和浓度. 使用TaKaRa反转录试剂盒将RNA反转录成cDNA, 按照TaKaRa 荧光定量试剂盒使用说明配制反应体系, 以GAPDH为内参置于实时荧光定量PCR仪上进行扩增, 每个样品重复3次, 实验结果分析采用F = 2^-△△Ct法. GAPDH引物: 正向: 5'-CACCATTGGCAATGAGCGGTTC-3', 反向: 5'-AGGTCTTTGCGGATGTCCACGT-3'; miR-206引物: 正向: 5'-AGTTCACCTTGATGCCGTTCT-3', 反向: 5'-CAGTGCTTCAGCC GCTACCC-3'; GOLPH3引物: 正向: 5'-AAGCCGTTCTTGACAAATGG-3', 反向: 5'- AGGGGCCATCCACAGTCCTTC-3'.

1.2.3 MTT法检测细胞活力: 分别在各组细胞培养24 h、48 h、72 h时加入20 μL浓度为5 mg/mL的MTT, 继续孵育4 h; 去除多余培养液后加入150 μL DMSO振荡反应10 min, 酶标仪检测490 nm处吸光度(OD)值. 细胞活力 = (对照组OD值-实验组OD值)/实验组OD值×100%.

1.2.4 细胞凋亡检测: 取生长状态良好的各组细胞, 0.25%胰蛋白酶消化后4 ℃、300 g离心10 min, 弃上清收集细胞. 使用Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒加入5 μL Annexin V-FITC和10 μL PI, 轻轻混匀后室温避光孵育15 min, 流式细胞仪检测细胞凋亡.

1.2.5 Western blot: 收集各组细胞, 加入RIPA裂解液置于冰上裂解, 4 ℃, 12000 g离心10 min, 取上清液. 将蛋白样品进行SDS-PAGE电泳后转至PVDF膜上, 5%脱脂奶粉封闭液室温封闭1 h. 分别加入兔抗GOLPH3(1:1000)和GAPDH(1:1000)多克隆抗体4 ℃孵育过夜, TBST洗膜3次, 每次10 min; 加入HRP标记的山羊抗兔IgG(1:5000)室温孵育2 h, TBST洗涤; ECL发光显影, 每个蛋白样品重复3次.

1.2.6 双荧光素酶报告基因实验: Targetscan在线预测发现GOLPH3 3'UTR上存在miR-149的结合位点, 为进一步验证GOLPH3是否是miR-206的靶基因, 按照Lipofectamine 2000使用说明书, 将构建好的野生型GOLPH3 3'UTR-WT(含GOLPH3 3'UTR片段)和突变型GOLPH3 3'UTR-MUT(GOLPH3 3'UTR片段突变体)载体分别与miR-206 mimics、control mimics共转染至AGS细胞, 培养24 h后检测荧光素酶活性, 相对荧光强度 = 萤火虫荧光强度/海肾荧光强度.

统计学处理 使用GraphPad Prism 7和SPSS 22.0进行数据分析, 实验数据以mean±SD表示, 两组间数据比较采用LSD-t检验, 多组间数据比较采用单因素方差分析, P<0.05具有统计学意义.

2 结果

2.1 瑞芬太尼对AGS 和MKN-45细胞miR-206表达和细胞增殖及凋亡的影响

以40 nmol/L瑞芬太尼处理AGS和MKN-45细胞, 细胞中miR-206表达均上调(P<0.05), 对比Con组, Re组细胞活力均显著降低(P<0.05), 凋亡率均显著升高(P<0.05)(图1).

图1 瑞芬太尼对AGS和MKN-45细胞miR-206表达和增殖、凋亡的影响. A-C: 瑞芬太尼对AGS细胞中miR-206表达、增殖和凋亡的影响; D-F: 瑞芬太尼对MKN-45细胞中miR-206表达、增殖和凋亡的影响; G: 瑞芬太尼对AGS和MKN-45细胞凋亡的影响. ^aP<0.05, 与Con组比较.

2.2 过表达miR-206抑制AGS和MKN-45细胞增殖并诱导凋亡

将miR-206 mimics转染至AGS和MKN-45细胞后, 细胞中miR-206表达水平均升高(P<0.05), 细胞活力均显著降低(P<0.05), 同时细胞凋亡率均显著上升(P<0.05)(图2).

图2 过表达miR-206对AGS细胞增殖和凋亡的影响. A-C: 过表达miR-206对AGS细胞增殖、凋亡的影响; D-F: 过表达miR-206对MKN-45细胞增殖、凋亡的影响. ^aP<0.05, 与miR-NC组比较.

2.3 抑制miR-206表达对瑞芬太尼介导的AGS和MKN-45细胞增殖、凋亡的影响

由图3可知, 40 nmol/L瑞芬太尼能够有效促进AGS和MKN-45细胞中miR-206表达(P<0.05), 抑制细胞活力(P<0.05)并诱导细胞凋亡(P<0.05), 而将miR-206 inhibitors转染至AGS和MKN-45细胞后, 细胞中miR-206表达水平、细胞活力和凋亡率均有所恢复(P<0.05).

图3 抑制miR-206表达对瑞芬太尼介导的AGS和MKN-45细胞增殖、凋亡的影响. A-C: 抑制miR-206表达对瑞芬太尼介导的AGS细胞增殖、凋亡的影响; D-F: 抑制miR-206表达对瑞芬太尼介导的MKN-45细胞增殖、凋亡的影响. ^aP<0.05, 与Con组比较; ^cP<0.05, 与Re+anti-miR-NC组比较.

2.4 miR-206靶向调控GOLPH3蛋白表达

通过Target scan预测发现, GOLPH3 3'UTR上存在miR-206的结合位点, 同时, miR-206 mimics与GOLPH3 3'UTR野生型质粒共转染, 荧光素酶活性降低(P<0.05), 而与GOLPH3 3'UTR突变型质粒共转染, 荧光素酶活性无明显变化; 并且miR-206可把调控GOLPH3蛋白表达(P<0.05)(图4).

图4 miR-206靶向调控GOLPH3蛋白表达. A: GOLPH3 3'UTR上含有miR-206的互补序列; B: 双荧光素酶活性检测; C: GOLPH3蛋白表达检测; D: miR-206调控GOLPH3蛋白表达. ^aP<0.05, 与miR-NC组比较; ^cP<0.05, 与anti-miR-NC组比较.

2.5 瑞芬太尼抑制AGS和MKN-45细胞中GOLPH3表达

以40 nmol/L瑞芬太尼处理AGS和MKN-45细胞, 细胞中GOLPH3在mRNA和蛋白水平的表达较Con组均显著下调(P<0.05)(图5).

图5 瑞芬太尼抑制AGS和MKN-45细胞中GOLPH3表达. A: 瑞芬太尼对AGS和MKN-45细胞中GOLPH3蛋白表达的影响; B和C: 瑞芬太尼对AGS细胞中GOLPH3 mRNA和蛋白表达的影响; C: 瑞芬太尼对MKN-45细胞中GOLPH3 mRNA和蛋白表达的影响. ^aP<0.05, 与Con组比较.

2.6 敲减GOLPH3对AGS和MKN-45细胞增殖、凋亡的影响

将GOLPH3 siRNA转染至AGS和MKN-45细胞后, 细胞中GOLPH3蛋白表达均下调(P<0.05), 对比si-NC组, si-GOLPH3组细胞活力均显著降低(P<0.05)而凋亡率均显著升高(P<0.05)(图6).

图6 敲减GOLPH3对AGS和MKN-45细胞增殖、凋亡的影响. A: 敲减GOLPH3对AGS和MKN-45细胞中GOLPH3蛋白表达的影响; B-D: 敲减GOLPH3对AGS细胞增殖、凋亡的影响; E-G: 敲减GOLPH3对MKN-45细胞增殖、凋亡的影响. ^aP<0.05, 与pcDNA组比较.

2.7 过表达GOLPH3可逆转瑞芬太尼对AGS和MKN-45细胞的增殖抑制和凋亡促进作用

由图7可知, 40 nmol/L瑞芬太尼能够有效抑制AGS和MKN-45细胞中GOLPH3表达和细胞活力(P<0.05)、促进细胞凋亡(P<0.05); 而将pcDNA-GOLPH3转染至AGS和MKN-45细胞进行预处理后, 细胞中GOLPH3蛋白表达水平、细胞活力和凋亡率均基本恢复至正常水平(P<0.05).

图7 过表达GOLPH3可逆转瑞芬太尼对AGS细胞增殖的抑制和凋亡的促进作用. A: 过表达GOLPH3对AGS和MKN-45细胞中GOLPH3蛋白表达的影响; B-D: 过表达GOLPH3对AGS细胞增殖、凋亡的影响; E-G: 过表达GOLPH3对MKN-45细胞增殖、凋亡的影响. ^aP<0.05, 与Con组比较; ^cP<0.05, 与Re+pcDNA组比较.

3 讨论

阿片类镇痛药在癌症患者手术治疗中具有广泛的应用, 其除镇痛外, 还具调节癌细胞增殖的作用[10,11]. 有研究报道, 吗啡具有促进癌细胞凋亡的作用, 瑞芬太尼可抑制肺癌细胞生长[12]. 本研究运用qRT-PCR、Western blot检测了瑞芬太尼处理的GC细胞AGS、MKN-45中miR-206、GOLPH3的表达发现, 瑞芬太尼可上调miR-206的表达, 下调GOLPH3的表达.

微小RNA(microRNA, miRNA)是一类长度约18~22nt的内源性非编码RNA分子, 能够通过与靶mRNA 3'UTR区互补配对使其降解或抑制其·译过程, 从而调控多种基因表达, 参与细胞生长、分化、胚胎发育、炎症反应、免疫应答等生理过程, 与人类肿瘤的发生发展密切相关[13]. 已有证据[14,15]显示, miR-519d、miR-138和miR-204等多种RNA分子在GC组织中异常表达, 其表达水平与肿瘤临床分期、淋巴结转移有关, 能够通过调节细胞周期、基质金属蛋白酶表达抑制细胞增殖和转移, 从而发挥抑癌作用. 而miR-206由于首次在骨骼肌中被发现, 被认为与骨骼肌的生理病理过程有关, 其在骨骼肌发育及相关疾病中的研究较多[16]. 但近年来发现, miR-206在肺脏、肝脏等组织器官中也有表达, 并且在非小细胞肺癌、肺腺癌、肝癌、鼻咽癌等肿瘤组织或细胞中低表达, 上调miR-206表达可通过阻滞细胞周期、促进细胞凋亡、抑制细胞转移和血管生成发挥抑癌作用[17-19]. 此外, Wang等[20]研究发现, miR-206能够通过靶向调节三磷酸腺苷结合盒转运子B亚家族成员1(ABCB1)表达降低乳腺癌细胞对紫杉醇的耐药性. 而在GC中, 已有研究[21]表明, miR-206在GC组织中低表达, 过表达miR-206能够抑制肿瘤起始细胞的形成, 并增强5-氟尿嘧啶的抗肿瘤作用.

本文检测发现, 过表达miR-206同样能够抑制细胞活力并诱导凋亡; 而下调miR-206表达则逆转瑞芬太尼对AGS、MKN-45细胞活力的抑制和凋亡的促进作用. 提示, 瑞芬太尼对AGS、MKN-45细胞增殖和凋亡的抑制或促进作用可能是通过调节miR-206表达来完成. 进一步预测miR-206的靶基因发现, miR-206能够与GOLPH3 3'UTR区的部分序列互补配对; 同时, 双荧光素酶报告基因实验和Western blot结果显示, miR-206能够靶向调控GOLPH3蛋白表达. 提示, GOLPH3可能在瑞芬太尼调节miR-206表达抑制AGS、MKN-45细胞增殖并诱导凋亡的过程中发挥重要作用.

GOLPH3是一种新型癌基因, 定位于人染色体5p13.3, 主要存在于高尔基体囊泡反面的膜外围、小管、质膜等部位, 参与蛋白糖基化修饰、促进蛋白从高尔基体到细胞膜的囊泡运输、维持高尔基体结构并影响高尔基体分泌功能[22]. 多项研究[23,24]表明: GOLPH3在结肠癌、上皮性卵巢癌等多种实体瘤组织中高表达, 其表达水平与肿瘤生长、患者预后有关. GOLPH3能够通过磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)复合体的特定底物激活mTOR信号传导, 而mTOR信号通路与细胞生长、增殖、能量代谢等有关; 并激活Wnt信号通路, 促进癌细胞增殖, 减少细胞凋亡; 对食管鳞状细胞癌、肝癌等消化道肿瘤发挥促进作用[25,26]. 已有证据[27]表明, miR-134能靶向抑制GOLPH3表达从而抑制GC细胞增殖, 过表达GOLPH3则逆转miR-134对细胞增殖的抑制作用. 本文中, 沉默GOLPH3表达可有效抑制细胞活力并促进细胞凋亡; 过表达GOLPH3则逆转瑞芬太尼对细胞活力的抑制和凋亡的促进作用.

总之, 瑞芬太尼可能是通过miR-206靶向调控GOLPH3表达、同时下调GOLPH3表达, 从而抑制AGS、MKN-45细胞活力、诱导细胞凋亡; 单独过表达miR-206或敲减GOLPH3, 同样能够抑制细胞活力并诱导凋亡. 这一研究结果有望为瑞芬太尼用于GC的治疗及miR-206和GOLPH3作为GC治疗的新靶点提供实验基础.

文章亮点

实验背景

近些年, 瑞芬太尼在癌症治疗中的新功能得到不断开发, 但其对胃癌(gastric cancer, GC)细胞的作用机制国内外尚未有人研究.

实验动机

本研究旨在研究瑞芬太尼对GC细胞增殖、凋亡的影响, 并探讨其分子作用机制, 以期望为解决GC治疗过程中的耐药问题提供线索.

实验目标

探讨瑞芬太尼抑制为癌细胞增殖, 促进凋亡的作用及其机制, 以期为GC的治疗提供新药.

实验方法

将用40 nmol/L的瑞芬太尼处理的AGS和MKN-45细胞, 分别随机分成miR-206组、miR-NC组、anti-miR-206组、anti-miR-NC组、GOLPH3组、si-NC组、pcDNA-GOLPH3组、pcDNA组、Re组、Con组、Re+anti-miR-206组、Re+anti-miR-NC组、Re+pcDNA-GOLPH3组、Re+pcDNA组, 用MTT法、流式细胞术分析GC细胞的增殖、凋亡, Western blot检测GC细胞中GOLPH3的蛋白表达, 双荧光素酶报告基因检测实验验证miR-206与GOLPH3的靶向关系.

实验结果

本研究建立瑞芬太尼治疗的GC细胞发现, 瑞芬太尼通过上调miR-206, 下调GOLPH3, 发挥抑制GC细胞增殖, 诱导其凋亡的治疗作用. 上调GOLPH3或下调miR-206均能逆转瑞芬太尼对GC的治疗功效.

实验结论

瑞芬太尼可抑制GC细胞的增殖, 诱导为癌细胞的凋亡, 其可能与调控miR-206/GOLPH3通路有关, 提示瑞芬太尼具有治疗GC的潜力.

展望前景

本研究仅在体外研究瑞芬太尼对GC细胞增殖、凋亡的影响, 后期还需增加瑞芬太尼对GC细胞的增殖、凋亡的裸鼠体内对比实验, 以更清晰的展示瑞芬太尼对GC细胞的治疗价值, 也为瑞芬太尼治疗GC提供更充分的理论依据.

备注

学科分类: 胃肠病学和肝病学

手稿来源地: 浙江省

同行评议报告分类

A级 (优秀): 0

B级 (非常好): 0

C级 (良好): C, C

D级 (一般): 0

E级 (差): 0

编辑:崔丽君 电编:张砚梁

参考文献

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