化痰活血扶正方及其拆方后的相关药组对模型大鼠肝纤维化指标的影响

摘要

目的

观察化痰活血扶正方拆方后的相关药组对肝纤维化大鼠模型肝功能及肝纤维化指标的影响, 并探讨其作用机制.

方法

选择雄性SD大鼠120只, 随机分为正常组(control)、模型组(model)、阳性药物组(Silybin)、低中高剂量化痰组(HTL、HTM、HTH)、低中高剂量活血化瘀组(HXHYL、HXHYM、HXHYH)、低中高剂量扶正组(FZL、FZM、FZH)、低中高剂量化痰活血扶正组(HTHXFZL、HTHXFZM、HTHXFZH). 除正常照组外, 其余各组大鼠均腹腔注射4% TAA(水为溶剂)0.05 mL/kg体重, 剂量200 mg/kg, 每周2次, 持续8 wk. 造模开始次日, 各低、中、高剂量组分别按照0.25, 0.5, 1.0 g/kg剂量, 每日1次、予10 mL/kg体重不同浓度的药物灌胃, 阳性药物组给予水飞蓟宾50 mg/kg体重灌胃, 每日1次, 用药8 wk. 观察治疗前后的肝功能[谷草转氨酶(aspartate transaminase, AST)、谷丙转氨酶(alanine transaminase, ALT)、总蛋白(total protein, TP)、AIb、GLB]、肝纤维化指标[层黏连蛋白(laminin, LN)、COL₄、透明质酸(hyaluronic acid, HA)].

结果

干预后, 各组血清的AST、ALT均有下降, 除FZL组外, 其余各组与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01或P<0.001); HTM、HTHXFZH的TP与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01), HTM、HTH、HXHYM、FZM、FZH、HTHXFZM、HTHXFZH的AIb与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01或P<0.001). 各治疗组的LN均有下降, 除HXHYM组、FZM组外, 其余各组与模型组相比差异显著, 均有统计学意义(P<0.05、P<0.01或P<0.001); 各治疗组的COL₄均有下降, 除HTL、HTH、HXHYM、HXHYH、FZL、FZH组外, 其余各组与模型组相比差异显著, 均有统计学意义(P<0.05或P<0.001); 各治疗组的HA均有下降, 其中HXHYM、FZL、HTHXFZH与模型组相比差异显著, 均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).

结论

化痰活血扶正方拆方后各药组可显著改善肝纤维化模型大鼠的肝功能及肝纤维化指标, 减缓肝纤维化进展速度.

关键词: 肝纤维化; 化痰法; 化痰活血扶正方; 拆方

核心提要: 肝纤维化的形成和发展取决于胶原的合成、沉积、降解和吸收的动态平衡. 本研究显示, 化痰方能促进蛋白合成、抑制肝脏胶原纤维的合成和释放, 抑制纤维增生, 有抗肝纤维化的作用; 活血化瘀扶正方对肝细胞损伤有保护作用.

Influence of phlegm reducing, blood activating, and body resistance strengthening decoction and its decomposed formulas on liver fibrosis in rats

Tang-Tang Lin, Bao-Ping Zheng, Hai-Hua Liu, Yang Tang, Hai Xiao, Li-Min Han

Tang-Tang Lin, Bao-Ping Zheng, Hai-Hua Liu, Yang Tang, Department of Traditional Chinese Medicine, the First Affiliated Hospital of Gannan Medical University, Ganzhou 341000, Jiangxi Province, China

Hai Xiao, Department of Pathology, the First Affiliated Hospital of Gannan Medical University, Ganzhou 341000, Jiangxi Province, China

Li-Min Han, Headmaster's Office of Gannan Medical University, Ganzhou 341000, Jiangxi Province, China

Supported by: National Natural Science Foundation of China, No. 81460707; Jiangxi Provincial Department of Education Science and Technology Research Project, No. 14686.

Correspondence to: Bao-Ping Zheng, Professor, Chief Physician, Department of Traditional Chinese Medicine, the First Affiliated Hospital of Gannan Medical University, 23 Qingnian Road, Zhanggong District, Ganzhou 341000, Jiangxi Province, China. baopingzheng@163.com

Received: March 20, 2018
Revised: May 15, 2018
Accepted: May 19, 2018
Published online: June 28, 2018

Abstract

AIM

To observe the effect of phlegm reducing, blood activating, and body resistance strengthening decoction and its decomposed formulas on liver function and hepatic fibrosis indexes in rats with liver fibrosis, and to explore the underlying mechanism.

METHODS

One hundred and twenty male SD rats were randomly divided into a normal group, a model group, a positive drug (silybin) group, low-, middle-, and high-dose phlegm reducing groups (HTL, HTM, and HTH), low-, middle-, and high-dose blood activating groups (HXHYL, HXHYM, and HXHYH), low-, middle-, and high-dose body resistance strengthening groups (FZL, FZM, and FZH), and low-, middle-, and high-dose phlegm reducing, blood activating, and body resistance strengthening decoction groups (HTHXFZL, HTHXFZM, and HTHXFZH). Except the normal group, the rats in the other groups were injected with 4% TAA in water at a dose of 200 mg/kg, twice a week for 8 wk. The next day after modelling, the low-, middle-, and high-dose groups were intragastrically given corresponding drugs at 0.25, 0.5, and 1.0 g/kg (once daily), respectively, and the positive drug group was given silybin 50 mg/kg body weight once daily for 8 wk. The liver function [aspartate transaminase (AST), alanine transaminase (ALT), total protein (TP), Alb, and GLB] and hepatic fibrosis indexes [laminin, COL₄, hyaluronic acid (HA)] were observed before and after treatment.

RESULTS

After intervention, serum AST and ALT decreased in all groups except the FZL group, and the differences between the other groups and the model group were statistically significant (P < 0.05, P < 0.01, or P < 0.001). Serum TP in the HTM and HTHXFZH groups was significantly different from that in the model group (P < 0.05 or P < 0.01). Serum Alb in the HTM, HTH, HXHYM, FZM, FZH, HTHXFZM, and HTHXFZH groups was significantly different from that in the model group (P < 0.05, P < 0.01, or P < 0.001). Serum LN decreased in each treatment group, and except the HXHYM and FZM groups, the difference between the other groups and the model group was significant (P < 0.05, P < 0.01 or P < 0.001). Serum COL₄ decreased in each treatment group, and except the HTL, HTH, HXHYM, HXHYH, FZL, and FZH groups, there was a significant difference between the other groups and the model group (P < 0.05 or P < 0.001). Serum HA decreased in each treatment group, and there was a significant difference between the HXHYM, FZL, and HTHXFZH groups and the model group (P < 0.05 or P < 0.01).

CONCLUSION

Phlegm reducing, blood activating, and body resistance strengthening decoction and its decomposed formulas can significantly improve liver function and liver fibrosis in rats with liver fibrosis.

Key Words: Liver fibrosis; Reducing phlegm; Phlegm reducing; Blood activating; Body resistance strengthening decoction; Decomposed formulas

0 引言

我国南方是一个肝病高发的区域, 慢性肝病进一步发展, 逐渐由肝纤维化成肝硬化、肝癌而危害人体健康, 给患者家庭及社会造成很大的影响. 目前西药在早期逆转或抗肝纤维化治疗方面无优势, 疗效欠佳且毒副作用明显. 中医认为肝纤维化的基本病机多为: 正虚血瘀[1]治法上, 众多中医学者从安络化纤[2]、益气化痰化瘀养阴[3,4]、化痰行瘀[5,6]、益气活血解毒[7]等方面研究肝纤维化. 抗肝纤维化的现代中医药研究主要是以其基本病机认识为依据, 在不同治法的指导下, 针对复方或单味中药及其单体展开的. 复方制剂有如: 上海中医药大学肝病研究所研制的"扶正化瘀胶囊"、北京友谊医院研制的"复方861合剂"、解放军第302医院研制的"复方鳖甲软肝片"等;单味药有白芥子、桃仁、红花、三七、丹参、赤芍、黄芪、川芎等20余种[8-19]. 根据相关文献报道, 上述复方或单味药物对改善症状及早期逆转肝纤维化均有统计学意义. 我们针对该病"痰阻、血瘀、正虚"的基本病机, 组创的"化痰活血扶正方"在临床上取得了较好疗效, 为了进一步探讨作用机制, 对其进行了拆方研究, 现做如下报道.

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物: 120只雄性SD大鼠, 体重160-200 g, 购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司(动物许可证号: SCXK(湘)2013-0004, 合格证号: 43004700022265).

1.1.2 试剂: 层黏连蛋白(laminin, LN)、透明质酸(hyaluronic acid, HA)、四型胶原(Ⅳ-C)放免试剂盒(北京北方生物技术研究所); 天冬氨酸氨基转移酶(aspartate transaminase, AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase, ALT)等试剂盒(南京建成生物工程研究所).

1.1.3 药物: 硫代乙酰胺(thioacetamide, TAA), 货号172502-500G. 白芥子, 法半夏, 炙甘草, 黄芪, 党参, 陈皮, 莪术, 当归, 桃仁, 茯苓, 白术等所用药材均由赣南医学院第一附属医院中药房提供(供货商: 江西赣隆药业有限公司, 执行标准: 《中国药典》2015版第一部, 生产许可证号: 赣20140001).

中药制备: 上述方药拆分为化痰药(芥子二陈汤)、活血化瘀药组(桃仁、莪术等)、扶正药组(黄芪、党参、当归等)、化痰活血扶正药组(全方). 每组药物均水浸过药面2 cm, 浸泡12 h以上, 第1煎, 加水3 L, 第2煎, 加水1.5 L, 均300 ℃煮开. 每遍煮开后200 ℃续煎30 min. 将两次煎煮药液合并, 旋转蒸发仪浓缩至1000 mL. 4 ℃冰箱保存备用.

1.2 方法

1.2.1 分组: 大鼠称重并按体重编号, 随机数字法分为15组: 正常组(control)、模型组(model)、阳性药物组(Silybin)、低中高剂量化痰组(HTL、HTM、HTH)、低中高剂量活血化瘀组(HXHYL、HXHYM、HXHYH)、低中高剂量扶正组(FZL、FZM、FZH)、低中高剂量化痰活血扶正组(HTHXFZL、HTHXFZM、HTHXFZH).

1.2.2 造模方法: 按照文献记载[20]进行造模, 除正常组外, 各组大鼠均腹腔注射4% TAA水溶剂, 200 mg/kg, 一周2次, 连用8 wk.

1.2.3 给药: 于造模开始次日给药, 每日1次, 各低、中、高剂量组分别按照0.25 g/kg, 0.5 g/kg, 1.0 g/kg剂量, 按10 mL/kg体重不同浓度的药物灌胃. 阳性药物组给予水飞蓟宾50 mg/kg体重, 每日1次灌胃; 给药8 wk. 对照组及模型组给予等体积的生理盐水.

1.2.4 生化指标检测: 给药8 wk后, 禁食12 h, 称重, 10%的水合氯醛麻醉(0.35 mL/100 g体重), 腹主动脉取血, 室温静置30 min; 4 ℃, 3500 rmp/min, 离心10 min分离血清, 分别检测血清HA、AST、ALT、Alb、TP、TBG含量. 取300 mg左右肝组织, 生理盐水为介质, 在冰上制成20%的匀浆, 生理盐水稀释成1%的匀浆, 检测LN、COL₄.

统计学处理 应用Prism5.0统计学软件分析. 组间比较采用单因素方差分析, 各项指标数据以(mean±SD)表示.

2 结果

2.1 各组大鼠肝功能比较

表1所示, 模型组与对照组相比, 血清AST、ALT显著升高, 差异有统计学意义(前者P<0.05, 后者P<0.001); 干预治疗后, 各组血清的AST、ALT均有下降, 除FZL组与模型组相比无统计学意义外, 其余各组与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01或P<0.001). 其中HTL、FZH的AST与模型组相比P<0.05; HXHYL、HXHTM、HTHXFZL的AST与模型组相比P<0.01; HTM、HTH、HXHYH、FZM、HTHXFZM、HTHXFZH的AST与模型组相比P<0.001. HTHXFZL的ALT与模型组相比P<0.01; HTL、HTM、HTH、HXHYL、HXHTM、HXHYH、FZM、FZH、HTHXFZM、HTHXFZH的ALT与模型组相比P<0.001.

表1 各药组对肝纤维化大鼠模型血清AST、ALT、TP、AIb、GLB的影响 (n = 8).

分组	AST (U/L)	ALT (U/L)	TP (g/L)	AIb (g/L)	GLB (g/L)
Model	126.2 ± 29.80	49.2 ± 6.43	58.8 ± 3.33	25.9 ± 1.13	33.2 ± 2.36
Silybin	195.5 ± 46.63a	101.3 ± 28.09a	51.7 ± 2.64a	23.8 ± 0.63a	27.1 ± 1.56a
HTL	151.6 ± 44.65	76.0 ± 15.76	55.3 ± 2.79	27.1 ± 1.63e	27.3 ± 0.43
HTM	125.3 ± 31.26c	62.8 ± 11.99e	51.5 ± 2.12	25.6 ± 0.79	25.9 ± 1.81
HTH	91.5 ± 19.06e	55.3 ± 10.73e	58.5 ± 4.44d	28.8 ± 2.07e	29.6 ± 2.51
HXHYL	91.8 ± 25.10e	53.6 ± 11.08e	55.9 ± 2.20	27.7 ± 0.86e	29.0 ± 1.23
HXHYM	109.6 ± 21.84d	59.0 ± 9.11e	55.7 ± 1.68	25.8 ± 0.92	30.0 ± 1.63
HXHYH	119.7 ± 26.54d	57.7 ± 11.43e	54.9 ± 2.25	26.1 ± 1.10c	28.8 ± 1.30
FZL	107.6 ± 23.96e	53.8 ± 9.15e	52.4 ± 1.04	24.7 ± 1.78	26.7 ± 2.04
FZM	143.8 ± 28.09	80.4 ± 17.81	52.5 ± 3.27	25.7 ± 1.25	26.4 ± 2.58
FZH	87.2 ± 31.09e	46.4 ± 10.83e	52.8 ± 4.14	27.7 ± 0.64e	25.9 ± 2.12
HTHXF	113.2 ± 43.81c	61.2 ± 23.92e	53.2 ± 3.42	26.9 ± 1.39e	27.5 ± 3.01
ZL	121.8 ± 29.65d	65 ± 19.24d	50.6 ± 2.59	25.1 ± 0.66	25.4 ± 1.95
HTHXF	105.2 ± 29.85e	60.6 ± 9.81e	52.9 ± 1.60	26.6 ± 0.43d	26.1 ± 1.38
ZM	102.8 ± 25.59e	63.0 ± 12.73e	56.6 ± 2.70c	27.5 ± 1.42e	29.1 ± 2.52
HTHXF
ZH

^aP<0.05与正常组比较;

^cP<0.05,

^dP<0.01,

^eP<0.001与模型组比较. AST: 谷草转氨酶; ALT: 谷丙转氨酶; TP: 总蛋白; AIb: 白蛋白; GLB: 球蛋白.

表1所示, 模型大鼠血清TP、AIb、GLB降低, 与对照组相比, 差异有统计学意义(P<0.05或P<0.001); 干预治疗后, HTL、HTHXFZL的TP及HTL、HXHYH、FZL、FZM、HTHXFZL、HTHXFZM的GLB外, 其它方药组大鼠血清的TP、AIb、GLB均有所升高; 尤以HTM、HTHXFZH的TP与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01), HTM、HTH、HXHYM、FZM、FZH、HTHXFZM、HTHXFZH的AIb与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01或P<0.001).

2.2 各组大鼠肝纤维化指标比较

表2所示, 模型组与对照组相比, 肝脏组织LN显著升高, 差异有统计学意义(P<0.001); 干预治疗后, 各治疗组的LN均有下降, 除HXHYM组、FZM组与模型组相比无统计学意义外, 其余各组与模型组相比差异显著, 均有统计学意义(P<0.05、P<0.01或P<0.001); 其中HTM、HXHYL、FZL、HTHXFZL与模型组相比P<0.05; HTL、HXHYH与模型组相比P<0.01; HTH、FZH、HTHXFZM、HTHXFZH与模型组相比P<0.001.

表2 各药组对肝纤维化大鼠模型LN、COL₄、HA的影响 (n = 8).

分组	LN	COL4	HA
Contrl	659.4 ± 87.34	314.8 ± 24.21	10.2 ± 0.79
Model	1021.6 ± 68.75a	400.8 ± 58.07a	13.8 ± 1.36a
Silybin	587.8 ± 44.10e	420.0 ± 31.40	11.0 ± 1.77
HTL	778.1 ± 123.46d	328.9 ± 53.50	12.8 ± 0.65
HTM	817.9 ± 93.64c	312.3 ± 63.74c	12.7 ± 1.78
HTH	630.1 ± 50.82e	353.3 ± 47.93	12.4 ± 1.75
HXHYL	818.7 ± 61.19c	282.0 ± 27.33e	13.2 ± 2.22
HXHYM	887.6 ± 94.67	348.7 ± 47.40	11.6 ± 1.01c
HXHYH	754.4 ± 114.4d	350.1 ± 57.72	11.7 ± 1.08
FZL	837.0 ± 103.79c	336.0 ± 42.03	11.7 ± 1.51c
FZM	838.2 ± 142.65	314.3 ± 59.28c	12.0 ± 1.11
FZH	695.7 ± 70.64e	344.6 ± 50.74	11.6 ± 1.07
HTHXFZL	801.3 ± 123.81c	274.4 ± 47.09e	12.2 ± 1.42
HTHXFZ	502.4 ± 122.0e	246.9 ± 22.2e	12.4 ± 1.05
M	720.6 ± 136.14e	252.9 ± 30.8e	11.4 ± 0.89d
HTHXFZH

^aP<0.05与正常组比较;

^cP<0.05,

^dP<0.01,

^eP<0.001与模型组比较. LN: 层黏连蛋白; COL₄: Ⅳ型胶原蛋白; HA: 透明质酸酶.

表2所示, 模型组与对照组比较, 肝脏组织COL₄显著升高, 差异有统计学意义(P<0.05); 干预治疗后, 各治疗组的COL₄均有下降, 除HTL、HTH、HXHYM、HXHYH、FZL、FZH组与模型组相比无统计学意义外, 其余各组与模型组相比差异显著, 均有统计学意义(P<0.05或P<0.001); 其中HTM、FZM与模型组相比P<0.05; HXHYL、HTHXFZL、HTHXFZM、HTHXFZH与模型组相比P<0.001.

表2所示, 模型组与对照组比较, 血清HA显著升高, 差异有统计学意义(P<0.001); 干预治疗后, 各治疗组的HA均有下降, 其中HXHYM、FZL、HTHXFZH与模型组相比差异显著, 均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).

3 讨论

目前认为, 保护肝功能可减少肝细胞的炎症破坏, 而炎症破坏是肝纤维化过程中的必要环节. 除肝细胞破坏之外, 肝星状细胞合成ECM沉积于肝脏也被认为是肝纤维化形成的重要环节[21], 其中ECM的主要成分为LN、HA、Ⅳ-C和PC-Ⅲ, 肝纤维化患者病情进展过程中 ECM 的血清含量亦随之相应变化[22].

ALT和AST是反映肝细胞是否损伤及损伤程度的重要指标. 在肝纤维化的进程中, 由于肝细胞不同程度损伤酶系外渗到血液,从而造成ALT、AST 在血中的浓度显著上升. 本研究显示: 经低中高剂量化痰组(HTL、HTM、HTH)、低中高剂量活血化瘀组(HXHYL、HXHYM、HXHYH)、低中高剂量扶正组(FZL、FZM、FZH)、低中高剂量化痰活血扶正组(HTHXFZL、HTHXFZM、HTHXFZH)干预治疗后, 各组大鼠血清的AST、ALT均有下降, 除FZL组与模型组相比无统计学意义外, 其余各组与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01或P<0.001). 其中HTL、FZH的AST与模型组相比P<0.05; HXHYL、HXHTM、HTHXFZL的AST与模型组相比P<0.01; HTM、HTH、HXHYH、FZM、HTHXFZM、HTHXFZH的AST与模型组相比P<0.001. HTHXFZL的ALT与模型组相比P<0.01; HTL、HTM、HTH、HXHYL、HXHTM、HXHYH、FZM、FZH、HTHXFZM、HTHXFZH的ALT与模型组相比P<0.001. 上述研究结果不仅再次佐证了现代研究表明的活血化瘀、扶正等中医治法及相关中医药对肝细胞损伤的保护作用, 同时也在一定程度上表明化痰治法及其相关的中医药亦对肝细胞的损伤具有保护作用.

蛋白是反映肝细胞合成代谢功能的指标. 总蛋白为白蛋白和球蛋白之和. 白蛋白在体内起到营养细胞和维持血管内渗透压的作用. 白蛋白的水平能在一定程度上反映正常肝细胞的数量. 肝功能受损时, 白蛋白产生减少, 其降低程度与肝炎的严重程度相平行. 肝纤维化患者常会出现白蛋白产生减少球蛋白产生增加, 导致A/G比值倒置. 本研究显示: 经低中高剂量化痰组(HTL、HTM、HTH)、低中高剂量活血化瘀组(HXHYL、HXHYM、HXHYH)、低中高剂量扶正组(FZL、FZM、FZH)、低中高剂量化痰活血扶正组(HTHXFZL、HTHXFZM、HTHXFZH)干预治疗后, HTL、HTHXFZL的TP及HTL、HXHYH、FZL、FZM、HTHXFZL、HTHXFZM的GLB外, 其它方药组大鼠血清的TP、AIb、GLB均有所升高; 尤以HTM、HTHXFZH的TP与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01), HTM、HTH、HXHYM、FZM、FZH、HTHXFZM、HTHXFZH的AIb与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05、P<0.01或P<0.001). 上述结果表明化痰法为指导下的化痰药组对肝纤维化乃至肝硬化过程中肝细胞受损导致的蛋白合成降低亦有较好的治疗作用.

肝纤维化的形成和发展取决于胶原的合成、沉积、降解和吸收的动态平衡. 当慢性肝损伤时, 活化的HSC产生大量的间质胶原和其他ECM成分沉积于狄氏间隙引起肝纤维化. 动物试验及临床研究均表明HA、LN、Ⅳ-C与肝纤维化程度呈正相关, 是反映肝脏增生的指标[23], 这些指标含量越高, 说明肝纤维化越严重. 有研究表明[24]化痰行瘀对实验性肝纤维化大鼠具有护肝、抗纤维化的功效. 本研究显示: 经低中高剂量化痰组(HTL、HTM、HTH)、低中高剂量活血化瘀组(HXHYL、HXHYM、HXHYH)、低中高剂量扶正组(FZL、FZM、FZH)、低中高剂量化痰活血扶正组(HTHXFZL、HTHXFZM、HTHXFZH)干预治疗后, 各治疗组的LN均有下降, 除HXHYM组、FZM组与模型组相比无统计学意义外, 其余各组与模型组相比差异显著, 均有统计学意义(P<0.05、P<0.01或P<0.001); 其中HTM、HXHYL、FZL、HTHXFZL与模型组相比P<0.05; HTL、HXHYH与模型组相比P<0.01; HTH、FZH、HTHXFZM、HTHXFZH与模型组相比P<0.001; 各治疗组的COL₄均有下降, 除HTL、HTH、HXHYM、HXHYH、FZL、FZH组与模型组相比无统计学意义外, 其余各组与模型组相比差异显著, 均有统计学意义(P<0.05或P<0.001); 其中HTM、FZM与模型组相比P<0.05; HXHYL、HTHXFZL、HTHXFZM、HTHXFZH与模型组相比P<0.001; 各治疗组的HA均有下降, 其中HXHYM、FZL、HTHXFZH与模型组相比差异显著, 均有统计学意义(P<0.05或P<0.01). 上述结果表明化痰药组可抑制肝脏胶原纤维的合成和释放, 抑制纤维增生,具有抗肝纤维化的作用.

文章亮点

实验背景

肝纤维化是由病毒、酒精、药物、毒物等各种损伤因素长期刺激肝脏引起炎症反应, 肝脏内的星状细胞活化, 细胞外基质(extracellular matrix, ECM)合成和降解失衡, 胶原纤维逐渐沉积的病理过程. 中医学虽无肝纤维化的概念, 但近几十年来中医对肝纤维化研究积累了丰富的经验. 根据"痰、瘀、虚"机理, 前期我们已经对化痰活血扶正全方进行研究, 结果显示该方能显著升高模型组大鼠的SOD活性、明显降低其MDA水平. 这表明: 化痰活血扶正方通过清除自由基和抑制自由基的过氧化反应, 可达到抗肝纤维化的作用. 本研究是上述实验的基础上,进一步探究化痰活血扶正全方及其拆方对肝纤维化指标的影响.

实验动机

在临床上, 很多病人在"血瘀、正虚"基础上兼有"痰"的症候, 因此我们以"痰、瘀、虚"基本病机理论为指导, 创立的"化痰活血扶正方"在临床上取得了较好疗效. 本研究将"化痰、活血、扶正"相结合, 对化痰活血扶正方及其拆方深入探讨, 探究其基本病机的现代生物学支持.

实验目标

此项实验研究的主要目标为: 论证化痰活血扶正及拆方对肝功能的保护作用, 及其对肝纤维化指标的影响. 实现本目标的意义: 对"化痰扶正活血方"不同药组抗肝纤维化的机制进行研究, 探讨"化痰法、活血化瘀法、扶正法"各自抗肝纤维化的主要作用靶点及其初步机制. 寻求其基本病机中"痰"、"瘀"、"虚"各自的细胞生物学支持, 深化中医学对肝纤维化"痰瘀互阻, 正气不足"基本病机理论的认识, 为肝纤维化从"痰、瘀、虚"论治提供实验依据.

实验方法

对120只雄性SD大鼠随机分组, 分别为正常组、模型组、阳性药物组、低中高剂量化痰组、低中高剂量活血化瘀组、低中高剂量扶正组、低中高剂量化痰活血扶正组. 除正常照组外, 其余各组大鼠均腹腔注射4% TAA造模(具体方法详见正文). 造模开始次日, 开始予以上述各组中药药液灌胃, 阳性药物组给予水飞蓟宾灌胃(具体用量见正文), 每日1次, 用药8 wk. 观察治疗前后的肝功能(AST、ALT、TP、AIb、GLB)、肝纤维化指标(LN、COL₄、HA).

实验结果

从实验数据分析, 中药相关药组干预后, 治疗组与模型组疗效对照如下: 在肝功能的改善方面, 化痰组、活血化瘀组、化痰活血扶正组对降低AST、ALT均有统计学意义(P<0.05、P<0.01或P<0.001); 化痰中剂量组和化痰活血扶正高剂量组能显著升高TP, 有统计学意义(P<0.05或P<0.01); 化痰中高组、扶正中高组、化痰活血扶正中高组能显著升高AIb, 有统计学意义(P<0.05、P<0.01或P<0.001), 上述结论表明化痰法为代表的相应药组对保护肝细胞、改善肝功能有显著疗效. 在改善肝纤维化方面, 化痰活血扶正高剂量组对肝纤维化三个指标(LN、COL₄、HA)均能显著降低, 表明该药组具有抗肝纤维化的作用.

实验结论

实验结果显示, 化痰活血扶正高剂量药组除能改善肝功能外, 还有抗肝纤维化的作用, 而其他药组在综合疗效上则各有差异, 为抗肝纤维化从"痰、瘀、虚"论治提供了实验数据支持.

展望前景

肝纤维化、肝硬化在祖国医学中属于"胁痛、积聚、臌胀"等范畴, 其病机: 本虚标实, 标为"痰、瘀", 故临床治疗多从"化痰、活血化瘀、扶正"方面着手. 本研究在实验室数据上有了一定的佐证, 但动物实验与临床病例中的疗效是否有差异, 仍需进一步的研究探讨.

备注

学科分类: 胃肠病学和肝病学

手稿来源地: 江西省

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编辑: 马亚娟 电编:张砚梁

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